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中���提取技术处理黄芪多糖的分离纯化
新闻作者:网站管理员 来自:郑州天一萃取科技118彩票 发布时间:2016-06-28 17:14:54 浏览:1938

中药提取技术处理黄芪多糖的分离纯化

    多糖的结构与蛋白质和核酸相似,都可分为一级、二级、三级和四级结构。一级结构包括糖基组成、排列顺序、糖链有无分支、分支的位置和长短等。多糖骨架间以氢键结合所形成的各种聚合物就是其二级结构,除此以外还有三级和四级结构的存在,这说明多糖的结构非常复杂,对其进行分离纯化得到均一组分的多糖,需要多种方法的结合。

    多糖是动、植物体内重要的生物活性物质,可以说所有动植物均有多糖。越来越多的研究发现,多糖对人体具有极大的利用价值,许多中药如人参、黄芪、当归、五味子、夏枯草、芦根、灵芝等,还有许多营养价值较高的食用菌如香菇、猴头菇、金针菇等。多糖纯化方法很多,多糖的性质是其分离纯化的基础[76」,简单介绍以下几种常用的方法。中药提取技术处理黄芪多糖的分离纯化

    1.分级沉淀法

    利用不同多糖分子大小和溶解度不同而分离,常用的有季钱盐沉淀法和有机溶剂沉淀法。如安络小皮伞粗多糖的纯化方法,在多糖溶液中加入不同浓度乙醇溶液,得到多个多糖;天门冬冷水浸提物采用丙酮分级沉淀法得到3种多糖;铁皮石解多糖采用的就是漠化十六烷基三甲胺(CTAB)络合精制而得。

    2.凝胶柱层析法

    常用的凝胶有葡聚糖凝胶(Sephadex)和琼脂糖凝胶(Sepharose),以不同浓度的盐溶液和缓冲溶液作为洗脱剂,从而使不同大小的多糖分子得到分离纯化,但不适宜粘多糖的分离。一般生药提取物得以分离多用Sepharose, DEAEToyopearl, Sephacryl,  Sephadex精致得到各种多糖。如灵芝多糖、附子多糖、白术多糖、山药多糖等。

    3.纤维素阴离子交换剂柱层析法

    常用的交换剂为DEAE一纤维素和ECTEOLA一纤维素,分类硼砂型和碱型两种,洗脱剂可用不同浓度碱溶液、硼砂溶液、盐溶液,其优点可吸附杂质、纯化多糖,并适用于分离各种酸性、中型多糖和粘多糖。如百合多糖、北沙参多糖、太子参多糖等。中药提取技术处理黄芪多糖的分离纯化

    4.其他方法

透析、超滤及超速离心选用不同规格的超滤膜和透析袋进行超滤和透析以及一定条件下的超速离心操作,可按分子大小将多糖样品分级,超滤和透析更常用于除去小分子物质。区带电泳主要按多糖的电荷性质不同分级,常用的有聚丙烯酞胺凝胶电泳、乙酸纤维素薄膜电泳。

5.1黄芪多糖的提取与纯化

    黄芪多糖是黄芪中的重要有效成分,为葡萄糖与阿拉伯糖的多聚体,分子量在两万以下。它的主要功效在于提高机体的免疫力,包括体液免疫、细胞免疫、机体非特异性免疫等。它能使动物的脾脏增大,脾内浆细胞增生,促进抗体合成,且能对抗强的松等免疫抑制剂的影响。中药提取技术处理黄芪多糖的分离纯化

查阅相关资料,黄芪多糖的分离纯化多采用水提醇沉,本实验采用此法得黄芪多糖粗品。醇沉法是目前应用最为广泛的一种精制方法,其原理是中药有效成分既溶于水又溶于醇,而水提取液中常含有粘液质、糊化淀粉、果胶、树胶、蛋白质等,用适当浓度的乙醇可以有效地沉淀除去。如药液中含醇量达60%可除去淀粉,含醇量达70%时,除蹂质、水溶性色素等少数无效成分外,大部分杂质均可沉淀除去。由于这种方法操作简单,技术与设备要求不高,故自七十年代初一直沿用至今,成为目前“法定”的精制方法。

5。2黄芪多糖的纯化

    根据黄芪多糖难溶于浓乙醇的性质,可以采用沉淀法对提取液进行纯化。具体制备流程如图5-1,在浓缩和离心分离后的提取液,加入无水乙醇,加入量按达到乙醇浓度为70%(vol%)就可以了。沉淀液静置24h以上,然后进行离心分离和过滤,沉淀用无水乙醇和丙酮进行多次洗涤,干燥得到黄芪多糖粗品。中药提取技术处理黄芪多糖的分离纯化

 

 

 

    本文针对黄芪多糖的提取和纯化进行了研究,发现用高压提取技术,黄芪多糖的后续分离杂质少,更容易分离纯化,取得比较满意的效果,但这只是初步的,我们得到的是多糖粗品,要得纯品需进一步进行纯化,如需除脂、除蛋白、除色素和低聚糖等小分子杂质等操作。中药提取技术处理黄芪多糖的分离纯化

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